抗擊腫瘤常規(guī)療法包括手術(shù)、放療、化療、生物治療和中醫(yī)中藥治療等，針對(duì)腫瘤在器官組織、分子水平的靶點(diǎn)不同，新型的靶向治療可以將藥物輸送到目標(biāo)腫瘤部位，減少藥物在正常組織的分布，提高藥物利用率。而實(shí)際上所謂的靶點(diǎn)受體也會(huì)頻繁地分布在許多非靶細(xì)胞/組織上。靶點(diǎn)和非靶點(diǎn)上的這種表達(dá)差異導(dǎo)致了具有靶點(diǎn)介導(dǎo)毒性的脫靶效應(yīng)，從而抑制了抗體相關(guān)療法的臨床應(yīng)用

為解決這個(gè)問(wèn)題，西南大學(xué)藥學(xué)院李翀教授團(tuán)隊(duì)基于非靶點(diǎn)和靶點(diǎn)之間的受體表達(dá)差異，提出了一種間接主動(dòng)靶向（INTACT）策略，以克服抗體介導(dǎo)療法中的靶向毒性，研究成果題為“Overcoming the On-Target Toxicity in Antibody-Mediated Therapies via an lndirect Active Targeting",發(fā)表于Advanced Science(DOI:10.1002/advs.202206912)。

INTACT策略的基本思路是使用具有適當(dāng)受體表達(dá)的細(xì)胞膜囊泡去預(yù)結(jié)合抗體，這種具有適當(dāng)受體水平的細(xì)胞膜被視為抗體或抗體介導(dǎo)的藥物靶向的預(yù)結(jié)合模塊，當(dāng)其結(jié)合過(guò)抗體并通過(guò)循環(huán)作用到達(dá)目標(biāo)后，不能被非靶位點(diǎn)的低表達(dá)受體替代，但可以在靶位點(diǎn)上競(jìng)爭(zhēng)性地解離，由此可以過(guò)濾非靶位點(diǎn)上的相互作用，因?yàn)樗鼈兊氖荏w表達(dá)較低。在結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)的背景下，與低受體表達(dá)細(xì)胞相比，受體數(shù)量增加了高受體表達(dá)細(xì)胞在配體識(shí)別和選擇性結(jié)合方面的優(yōu)勢(shì)，因此，通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合可確?？贵w藥物在靶點(diǎn)的按需釋放，通過(guò)優(yōu)選的結(jié)合減輕正常部位的靶向毒性。該策略在CD47抗體上得到驗(yàn)證，在一系列動(dòng)物模型（包括人源化PDX模型）上實(shí)現(xiàn)了其臨床關(guān)注的血液毒性顯著緩解，并伴有較好的治療效果。此外，INTACT策略被證明廣泛適用于各種系統(tǒng)，包括抗體、ADC和靶向遞送系統(tǒng)，為前沿抗體相關(guān)治療提供了一個(gè)完善特異性的潛在平臺(tái)。

INTACT策略示意圖：A） 具有適當(dāng)受體表達(dá)水平的靶細(xì)胞膜完成抗體負(fù)載。B） INTACT系統(tǒng)將靶細(xì)胞與低受體表達(dá)的非靶細(xì)胞區(qū)分開來(lái)，避免了靶向毒性，提高了綜合治療性能。 圖中標(biāo)識(shí)的是CD47抗體遞送系統(tǒng)，選擇CD47陽(yáng)性細(xì)胞系（小鼠乳腺癌細(xì)胞4T1）作為靶細(xì)胞，用DSPE-mPEG2000修飾其細(xì)胞膜（（形成PCM）），再包被到PLGA納米顆粒表面（形成PCM@NP)，將CD47抗體結(jié)合到PCM@NP通過(guò)孵育，最終形成anti-CD47-PCM@NP。

Anti-CD47-PCM@NP通過(guò)間接主動(dòng)靶向策略，在體外可有效地將靶細(xì)胞與表達(dá)CD47的非靶細(xì)胞區(qū)分開來(lái)。A）Anti-CD47-PCM@NP避免了RBC上CD47的封閉和隨后BMDM細(xì)胞的吞噬作用，因此規(guī)避了游離anti-CD47對(duì)RBC的靶向毒性。比例尺=50μm。B、C）流式細(xì)胞儀分析得出，PCM@NP和anti-CD47-PCM@NP在同靶4T1細(xì)胞(C)的結(jié)合過(guò)程中獲得了增強(qiáng)的和相當(dāng)的細(xì)胞攝取，卻有效地逃脫了巨噬細(xì)胞(B)的捕獲。D、E）與CD47?/?4T1細(xì)胞(E)相比，存在CD47高表達(dá)的4T1細(xì)胞(D)時(shí)，抗體選擇性地與PCM@NP分離，可見PE抗體（紅色）和PCM@NP/C6（綠色）的共定位圖像和分布圖。比例尺=20μm（多細(xì)胞圖像），2μm（單細(xì)胞圖像）。F）微流體裝置的示意圖。腫瘤細(xì)胞在微流控芯片的空腔中培養(yǎng)直至粘附，然后暴露于流動(dòng)的anti-CD47或anti-CD47-PCM@NP環(huán)境，并且在預(yù)定時(shí)間點(diǎn)捕獲熒光圖像。G）游離anti-CD47充分結(jié)合到CD47高表達(dá)的4T1細(xì)胞表面(a)。與CD47?/?4T1組細(xì)胞(c)相比，在4T1細(xì)胞存在時(shí)（b），抗體從PCM@NP上解離。（用FITC標(biāo)記抗體，綠色。PCM@NP用DiD標(biāo)記、紅色）。比例尺=10μm。數(shù)據(jù)表示為平均值±SD（n=3）。（*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，***p<0.0001；NS表示無(wú)顯著性。