圖1 Col-I改性尼龍線(xiàn)的特征。(A) Col-I改性后尼龍線(xiàn)的SEM圖。(B)原始尼龍線(xiàn)，RT Col-I@thread和凍干Col-I@thread的C 1s的高分辨率XPS光譜。(C) BCA法定量測定尼龍線(xiàn)上的Col-I吸附。

圖2.Col-I@thread上細胞的粘附和增殖。(A) MC3T3-E1細胞和4T1細胞MTT甲酸結晶紫圖像。(B) MTT增殖試驗量化MC3T3-E1和4T1的生長(cháng)。*表示p<0.05，**p<0.01，**p<0.001。(C)培養14天后成骨細胞MC3T3-E1的骨骼染色共聚焦圖像。細胞核用DAPI核染料染色(藍色)，微絲用Actin-Tracker標記(綠色)。

圖3 Col-I@thread和2D培養板上MC3T3-E1細胞的RNA-Seq分析。(A)差異表達基因火山圖。(B)豐富的KEGG通路注釋分類(lèi)。Q值<0.05為顯著(zhù)富集。(C)不同條件下細胞生長(cháng)的Venn圖。(D) Venn圖交集基因的基因表達熱圖和KEGG通路圖。

圖4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析I型膠原(Col I) (A)、骨橋蛋白(OPN) (B)、矮子相關(guān)轉錄因子2 (RUNX2) (C)和堿性磷酸酶(ALP) (D)在GAPDH表達水平(作為內控)上的表達水平(Col-I@thread和2D培養板)。(E)相對基因表達熱圖。(F)上下游基因信號通路。

圖5 在Col-I@thread上生長(cháng)的細胞鈣代謝增加。(A)細胞培養板和Col-I@thread上MC3T3-E1細胞胞內鈣的熒光圖像。(B)納米探針檢測單個(gè)細胞內鈣離子的圖像。(C)單細胞多模態(tài)分析系統定量的鈣離子熒光強度(***表示p<0.001, n=10)。(D)茜素紅s染色的成骨細胞礦化結節(E)在Col-I@thread上培養3、7、14天的MC3T3-E1堿性磷酸酶(ALP)活性。*表示p<0.05，**p<0.01, n=5。(F)成骨細胞MC3T3-E1培養后抗拉強度試驗。(G) MC3T3-E1支撐成骨細胞7、14、30天后Col-I@thread的力學(xué)性能。*表示p<0.05，**p<0.01, n=5。

圖6 共聚焦顯微鏡圖像的成骨細胞(紅色)與乳腺癌細胞4T1(綠色)共培養使用線(xiàn)為基礎的設備。三維重建側視圖顯示4T1細胞侵入成骨細胞。